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北京普利莱基因技术有限公司
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主营产品： 各种生化指标测定试剂盒、WB蛋白相关所有试剂、抗体、转染试剂、染色液
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基本参数
| 品牌 | 普利莱 | 产品名称 | 普利莱 总铁离子含量比色法检测试剂盒(Total Iron Content Colorimetric Assay Kit)E1042-100 |
| 产品规格 | 100次 | 储存 | 4℃保存 |
| 储存周期 | 6个月 | 供货能力 | 现货 |
| 供货数量 | 978 | 产品品牌 | APPLYGEN |
| 可售卖地 | 北京;天津;河北;山西;内蒙古;辽宁;吉林;黑龙江;上海;江苏;浙江;安徽;福建;江西;山东;河南;湖北;湖南;广东;广西;海南;重庆;四川;贵州;云南;西藏;陕西;甘肃;青海;宁夏;新疆 | 用途 | 总铁离子含量比色法检测试剂盒 |
| 货号 | E1042-100 |
普利莱 总铁离子含量比色法检测试剂盒(Total Iron Content Colorimetric Assay Kit)E1042-100
描述：
铁是人体必需的元素之一，对人体的新陈代谢和身体健康具有重要作用，血液中铁的含量不足，就会造成缺铁性贫血。铁存在于人体所有的细胞内，各组织、器官包括各内分泌腺都含有铁。肝脏、脾脏和肺组织内含量较为丰富。成人体内含铁3～5克，大部分都以蛋白质复合物形式存在，极少部分以离子的形态存在。本试剂盒采用亚铁嗪比色法可以定量细胞铁离子，线性范围5~300uM。产品包括标准品和空白对照，本试剂盒可进行100个样品的检测。
原理：
铁与蛋白结合成复合物，在酸性介质中铁从复合物中解离出来，再被还原剂还原成二价铁，并与亚铁嗪生成紫红色化合物，在540-580nm处可比色测定。 其反应如下图所示：
组成：
1.细胞裂解液： 20 ml
2.缓冲液： 5ml
3.检测剂： 3ml
4.标准品： 1ml
5.稀释用液： 20ml
储存：4℃保存，6个月有效。
适用范围：该试剂盒可用于培养细胞中铁离子定量检测。
用户自备：4.5%高锰 酸钾溶液5ml（0.225g高锰 酸钾溶解于5ml纯水中）
操作步骤：
1.样品准备：
首次实验建议使用六孔板培养细胞。将DMEM培养过的细胞用冷的PBS 2ml洗两遍，将PBS吸弃（若不马上检测可将其冻存于-20℃）。200ul/孔（或根据实际情况适量增减）裂解液裂解细胞，置于摇床裂解2h。
2.标准品的稀释：用试剂盒提供的稀释用液将3mM的标准品母液稀释为：300 uM、150uM、75uM、37.5uM、18.75uM、9.38uM、4.69uM。注意倍比稀释并设置0浓度对照反应管。
3.将缓冲液与4.5%高锰 酸钾溶液按1:1混匀，称为混液A。
4.参考下表使用1.5ml离心管，设置空白对照管、标准品管和样品管。如果样品中的铁元素含量过高，用裂解液适当稀释后再进行测定。
空白对照 |
稀释后的标准品 |
裂解的样品 |
|
稀释用液 |
100μl |
－ |
|
混液A |
100μl |
100μl |
100μl |
样品 |
－ |
－ |
100μl |
标准品工作液 |
－ |
100μl |
－ |
5.混匀，60℃ 孵育1h。
6.冷却至室温，将管盖与管壁上的液滴离心入管底。
7.加入30ul铁离子检测剂，混匀，室温孵育，30min。此步可能产生络合物沉淀，用移液器轻轻吹打即可溶解，若沉淀不溶，12000rpm离心5分钟，取上层清液即可。
8.取200ul于96孔板，在550nm测定吸光度。如果不能测定550nm，也可以在540nm~580nm范围内检测。
9. 绘制标准曲线并计算铁离子浓度。
说明：
1. 本试剂盒不受锰离子、镁离子、镍离子和锌离子等的干扰。 2. 操作过程中，样品与试剂等避免与铁器接触，以防污染。
3.所测样本的值高于标准曲线的上限，应稀释样品后重新测定。
4.为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作，检测试剂有腐蚀性，请小心操作，若不慎沾到皮肤上请马上用清水冲洗干净。
5.该试剂盒仅供科学研究使用。
北京普利莱基因技术有限公司
联系人：
张先生
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公司地址：
首科凯奇大厦
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