上海舟福科贸有限公司
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生物试剂病毒DNA提取试剂盒(磁珠法)100T

价格 890.00/盒
起订量 ≥1
所在地 上海 上海 可售量 10000盒

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基本参数

纯度 / 规格 KB052-100T
品牌 伊势久生物 产品名称 病毒DNA提取试剂盒(磁珠法)100T
名称 病毒DNA提取试剂盒(磁珠法)100T


非洲猪瘟病毒荧光定量PCR检测试剂盒说明书(探针法)

50头份/

作用与用途:

用于猪脾脏、淋巴结、肉品、血液及血液制品中病毒核酸的检测。

用法与判定:

1.用法

1.1样品处理:以下样品处理后置60℃灭活30分钟

1.1.1组织样品:100mg-200mg待检组织样品(脾脏、淋巴结、肉品),用研钵或者组织匀浆仪充分研磨匀浆后,加入1ml PBSpH7.2)混匀;然后以1000r/min离心3分钟,吸取200ul上清,置于1.5ml离心管中,编号备用。

1.1.2血液:采集抗凝血,吸取200ul,置1.5ml离心管中,编号备用。

1.1.3血液制品:100mg-200mg待检血液制品(如血浆蛋白粉),置于1.5ml离心管中,加入1ml PBSpH7.2),充分混匀震荡后,以10000r/min离心3分钟,吸取200ul上清,置于1.5ml离心管中,编号备用。

1.2样品存放:采集或处理好的样品在2-8℃保存应不超过24小时;若需长期保存,须放置-70℃以下冰箱,并应避免反复冻融。

1.3 DNA提取:用商品化试剂盒按其说明书,对处理好的样品提取DNA

1.4 荧光PCR反应体系的配置:取出试剂盒中的各组分,置室温(15-25℃)融化后瞬时离心,备用。每次检验设阴、阳性对照。设待检样品、阳性对照和阴性对照的样品总份数为n,按如下反应体系配置:

2 X qPCR Mix

12.5ul xn+1

引物探针预混液

7.5ul xn+1

总量

20ul xn+1

将以上配置的反应体系充分混匀后,按20ul/管分装至反应管中。分别取DNA样品5ul加入相应反应管中,盖紧管盖后瞬时离心。

1.5 荧光PCR反应条件:

温度

时间

循环数

说明

是否收集信号

95℃

3min

1cycle

预变性

95℃

15sec

40-45cycle

变性

60℃

30sec

退火,延伸

是(FAM

对于ABI荧光PCR仪,选择FAM通道读取检测结果,淬灭基团选择“MGB”

对于其它品牌的荧光PCR仪,选择FAM通道读取检测结果,淬灭基团选择“None”

本产品使用特殊的ROX Reference Dye,适用于所用qPCR仪器,无需在不同的仪器上调整ROX的浓度。

2.试验成立条件:

阳性对照Ct≤35并出现典型的扩增曲线,阴性对照无Ct值或无典型的扩增曲线,则判为试验成立。

3.判定:

待检测样品Ct≤35并出现典型的扩增曲线,判为阳性;待检样品无Ct值或35Ct≤40并且无典型的扩增曲线,判为阴性。

注意事项

1.试剂盒应在-20℃以下保存和运输。

2.本试剂盒仅用于科研检测使用,操作人员必须经过培训,试剂盒使用前请仔细阅读说明书全文。

3.不要使用过期组分或者不同批次组分混合使用。

4.使用时尽量避免反复冻融,如冻融,应不超过3次。

5.样品采集和处理过程应戴一次性手套,并及时更换,样品间严禁交叉污染。

6.荧光PCR实验严格分区操作,各区应有专用的手套、移液器等,不得交叉使用,避免污染;工作人员应遵循单方向工作原则,各工作区相对隔离。

7.进行荧光PCR实验的工作桌面及相关物品应定期用1%次氯酸钠、75%酒精、1mol/L盐酸依次灭菌和消毒,或定期用紫外灯灭菌和消毒。

8.测试样品时,应做好生物安全防护。

9.试验完毕后,使用过的试剂盒、样品和试剂应进行无害化处理。

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