生化试剂尿素氮（BUN）试剂盒说明书
| 价格 | ￥110.00/盒 | |
| 起订量 | ≥1 | |
| 所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000盒 |
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上海跃腾生物技术有限公司
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尿素氮（BUN）试剂盒说明书
微量法100T/96S
正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定
测定意义：
尿素是生物体内含氮化合物分解的终产物，在尿酶催化下分解转化成氨。血液尿素氮是肾功能的主要指标之一。
测定原理：
样本中尿素氮在氯化高铁一磷酸溶液中与二乙酰一肟和硫胺脲共煮，生成一种红色的二嗪化合物，其颜色的深浅与尿素氮含量成正比，采用二乙酰一肟法测定尿素氮含量。
组成：
产品名称
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NM022-100T/96S
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Storage
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试剂一：液体
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6ml
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4℃避光
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试剂二：液体
|
60ml
|
4℃避光
|
说明书
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一份
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自备仪器和用品：
天平、研钵、常温离心机、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、恒温水浴锅。
样品处理：
组织：按照质量（g）：蒸馏水体积(ml)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g，加入1ml蒸馏水）加入蒸馏水，匀浆后于25℃，10000g离心10min，取上清待测。
细胞：按照细胞数量（104个）：蒸馏水体积（ml ）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1ml蒸馏水），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后4℃，10000g离心10min，取上清置于冰上待测。
血清或其它液体：直接检测。
测定操作：
·
|
空白管
|
测定管
|
样品（μl）
|
|
20
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H2O（μl）
|
20
|
|
试剂一（μl）
|
50
|
50
|
试剂二（ml）
|
500
|
500
|
混匀，沸水浴10min，冷却后，540nm下测定吸光值。△A=A测定-A空白。空白管只要做一管。
尿素氮含量计算：
a.用微量石英比色皿测定的计算公式如下
标准条件下测定回归方程为y =2.048x + 0.0229，R2 = 0.9943；x为标准品浓度（mg/ml），y为吸光值。
1、按照血清（浆）或者细胞培养液体积计算
尿素氮含量(mg/ml)= (△A-0.0229)÷2.048=0.4882×(△A-0.0229)
2、按照样本质量计算
尿素氮含量mg/g鲜重)= (△A-0.0229)÷2.048×V样总÷W=0.4882×(△A-0.0229)÷W
3、按照蛋白浓度计算
尿素氮含量(mg/mg prot)= (△A-0.0229)÷2.048÷Cpr=0.4882×(△A-0.0229) ÷Cpr
V样总：加入提取液体积，1 ml； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/ml；W：样本质量，g；
b.用96孔板测定的计算公式如下
标准条件下测定回归方程为y = 1.024x + 0.0229，R2= 0.9943；x为标准品浓度（mg/ml），y为吸光值。
1、按照血清（浆）或者细胞培养液体积计算
尿素氮含量(mg/ml)= (△A-0.0229)÷1.024=0.9766×(△A-0.0229)
2、按照样本质量计算
尿素氮含量(mg/g鲜重)= (△A-0.0229)÷1.024×V样总÷W=0.9766×(△A-0.0229)÷W
3、按照蛋白浓度计算
尿素氮含量(mg/mg prot)= (△A-0.0229)÷2.048÷Cpr=0.9776×(△A-0.0229) ÷Cpr
V样总：加入提取液体积，1 ml； Cpr：样本蛋白质浓度，mg/ml；W：样本质量，g；500：或细胞总数，500万。
上海跃腾生物技术有限公司
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