血液基因组提取试剂
| 价格 | ￥1280/盒 | |
| 起订量 | ≥1 | |
| 所在地 | 江苏 苏州 | 可售量 10000盒 |
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苏州凯发新材料科技有限公司
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主营产品： MOF、黑磷、石墨炔、纳米酶、多层风琴状
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01/产品介绍
本试剂盒基于硅基磁珠特异性吸附DNA的原理，酶解法释放血液基因组，特定高效裂解缓冲体系中结合DNA分子，改变环境离子强度，从而实现基因组DNA分离纯化。可从100-250ul血液样本中高效提取基因组，获得的基因组DNA适用于PCR反应、酶切反应及Southern杂交等下游实验。
02/产品优势
无需酚或氯仿等有毒试剂
同时兼容新鲜，冷冻及抗凝血样本（EDTA抗凝、肝素抗凝及柠檬酸盐抗凝）
操作简便快捷，质量好
03/产品内容
04/保存条件
室温保存1年有效。
05/自备试剂
异丙醇，无水乙醇
06/质检实例
对以下样本进行DNA纯化: 200 μl EDTA、EDTANaF、肝素钠、柠檬酸钠等不同处理的人抗凝血、2 ml血液分离出的白膜层、10 μl鸡血和200 μl鼠血，M: TIANGEN Marker D15000。 洗脱体积均为100 μl ,琼脂糖凝胶电泳上样量为4μl。
实验结果分析:本试剂盒具有广泛的样品适用性，可对不同处理的人抗凝血及不同物种的血液进行高质量的DNA提取。
07/注意事项
初次使用前，请向BufferW1和BufferW2中加入相应体积的无水乙醇。
每次使用前摇匀各瓶中溶液，使体系均一，保证提取效果。
溶液放置一段时间后若产生沉淀，可37℃水浴溶解，不影响效果。
使用无菌离心管和枪头，避免外源核酸酶污染。
血液样品反复冻融，会导致提取的DNA片段较小且提取量下降。所得基因组DNA也应尽可能避免反复冻融，以免降解。如果提取冷冻血液的基因组DNA，建议37℃水浴，迅速解冻后再进行后续操作。
血液样品的储存：
1)短期保存：已加入抗凝剂的血液样品可在2～8℃储存最多10天，对于某些实验例 如Southern杂交等，需要得到完整全长的基因组DNA，请将血液样品在2～8℃储存不超过3天，此时基因组DNA的降解程度较轻。
2)长期保存：已加入抗凝剂的血液请置于-70℃保存(如果提取的是高分子量的DNA，推荐使用EDTA作为抗凝剂)。
08/使用方法
1.取100-250ul血液于1.5ml洁净离心管中。
2.向其中加入300ul Buffer KA和20ulProteinase K，漩涡混匀30s。
3. 68℃孵育（水浴和金属浴均可）10min，每间隔2-3min漩涡混匀5s。
4.加入200ul异丙醇漩涡混匀20s，加入20ul磁珠悬液（注意：加入前漩涡混匀磁珠悬液）。
5.漩涡混匀30smin，静置1min。
6.重复操作步骤5两次。
7.转移离心管置于磁力架上，进行磁分离后，小心吸去液体（注意：不要吸走磁珠）。
8.从磁力架上取下离心管，加入800ulBuffer W1，漩涡混匀2min，进行磁分离，吸去除磁珠以外的液体（注意：不要吸走磁珠）。
9.重复操作步骤8一次。
10.从磁力架上取下离心管，加入600ulBuffer W2，漩涡混匀2min，进行磁分离，吸去除磁珠以外的液体（注意：不要吸走磁珠）。
11.重复操作步骤10一次。
12.转移离心管于磁力架上，室温晾干8-10min（注意：晾干时间不可超过10分钟，否则会影响基因组质量）。
13.取下离心管，加入100-200ulBuffer TE，用移液枪吹吸混匀20次，65℃孵育8min，期间吹吸混匀2次。
14.转移离心管置于磁力架上，进行磁分离，转移除磁珠以外的液体于新的离心管中，-20℃保存。
09/常见问题及应对策略
◆获得的基因组DNA纯度低
1.建议增加Buffer W1和Buffer W2洗脱用量100ul。
2.选用新鲜血液样本进行提取。
3.洗涤过程中，磁珠未被充分打散，有蛋白聚集，建议增加吹吸或漩涡混匀的力度和时间。
4.用Buffer TE洗脱前未充分晾干，有少量乙醇残留。
◆获得的基因组DNA浓度低
1.建议更换新鲜的样本进行提取。
2.减少Buffer TE的用量，或延长65℃孵育时间至15min。
3.洗脱过程中，磁珠未充分磁分离就转移液体，造成磁珠损失。
4.加大磁珠10ul，以增加吸附力度，从而增大得率。
5.晾干时间超过10分钟，磁珠太过于干燥，洗脱效率下降。
6.用Buffer TE洗脱过程中未充分打散磁珠团块，造成基因组释放不充分。
◆提取过程中出现磁珠结团现象
在磁珠法提取过程中，由于大量染色质核酸吸附在磁珠表面，绝大多数情况下会出现磁珠结团的现象。此现象可作为核酸含量的判别指标，一般来说，有结团说明样本良好，吸附过程顺利高效，只要操作者在洗涤和洗脱过程中，充分打散团块就可得到理想的基因组DNA分子。
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