生物试剂 植物膜蛋白提取试剂盒
| 价格 | ￥1749.00/瓶 | |
| 起订量 | ≥1 | |
| 所在地 | 上海 上海 | 可售量 10000瓶 |
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上海跃腾生物技术有限公司
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植物膜蛋白提取试剂盒
产品简介：
植物膜蛋白提取试剂盒是一种提取和稳定膜蛋白的试剂盒。该试剂盒可以从植物组织中高效提取和稳定G偶联蛋白受体（GPCR）和其他膜相关蛋白，同时保持长期的受体完整性。萃取剂可以将受体包裹在去污剂胶束中，在4°C下储存长达1周，在-20°C下储存1个月时仍具有受体功能。在提取后如何稳定天然和功能形式的受体存在许多挑战，这使得在细胞膜外进行研究变得极为困难。这种提取试剂能够在1-2小时内从植物细胞或组织中有效提取功能受体。大多数功能性GPCR分析必须在提取受体后立即进行，随着时间的推移活性会迅速下降。本试剂盒提高了受体的稳定性，为研究人员提供了更大的样品灵活性。
本产品仅适用于科研实验，不可做他用。
产品组成：
组分名称
|
PC013-10T
|
PC013-100T
|
Storage
|
缓冲液A
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5×1ml
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50 ml
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2-8℃
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10×萃取剂B
|
0.5ml
|
5 ml
|
2-8℃
|
稀释液C
|
5×1ml
|
50ml
|
2-8℃
|
还原剂粉末D
|
6mg
|
60mg
|
2-8℃
|
100×蛋白酶抑制剂E
|
0.1ml
|
1ml
|
2-8℃
长期保存于-20℃
|
说明书
|
一份
|
||
有效期：
2-8℃保存，12个月有效，100×蛋白酶抑制剂E-20℃长期保存。
操作步骤（仅供参考）：
1）从不同样品类型中提取膜蛋白（植物组织）
1. 称取还原剂粉末0.5 mg，加入0.5 ml缓冲液，配置成1mg/ml还原剂的缓冲液（现配现用）。
2. 将植物组织用液氮研磨成粉末。称取粉末1g，加入0.5ml预冷的配置好的缓冲液重悬，并在冰上孵育20min（期间上下颠倒）。
3. 然后加入0.5ml 1×萃取剂（用稀释液将10×萃取剂稀释10倍到1×），上下混匀后在冰上萃取2小时。（为获得更好的萃取效果，在4°C下持续混匀）
4. 在4°C下以16,000×g离心20分钟。小心取出含有稳定蛋白受体的上清液，然后转移到新试管中。
5. 立即进行下游应用或将提取物等分试样储存，以备将来在4°C下使用长达1周或在-20°C下使用长达1个月，使受体功能损失最小。
2）从不同样品类型中提取膜蛋白（不含细胞质蛋白）
1. 将植物组织用液氮研磨成粉末。取1mg粉末，加入1×PBS重悬，4°C下以16,000×g离心20分钟。
2. 去掉上清，沉淀加入0.5ml的1mg/ml还原剂的缓冲液（现配现用，称取还原剂粉末0.5 mg，加入0.5 ml缓冲液，配置而成。），重悬，并在冰上孵育20min（期间上下颠倒）。
3. 然后加入0.5ml 1×萃取剂（用稀释液将10×萃取剂稀释10倍到1×），上下混匀后在冰上萃取2小时。（为获得更好的萃取效果，在4°C下持续混匀）
4.在4°C下以16,000×g离心20分钟。小心取出含有稳定蛋白受体的上清液，然后转移到新试管中。
5.立即进行下游应用或将提取物等分试样储存，以备将来在4°C下使用长达1周或在-20°C下使用长达1个月，使受体功能损失最小。
排除故障：
现象
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可能的原因
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建议操作
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裂解液浓度过低。
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组织太老
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选取幼嫩组织
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研磨不充分
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液氮研磨成细粉
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称取量不够
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按比例称取材料（如果有0.5g材料，加入0.25ml缓冲液和0.25ml萃取液。
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裂解液粘稠
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提取缓冲液的体积太低
|
增加提取缓冲液的体积（将2 ml提取缓冲液用于2g植物材料）
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受体产量低
|
细胞膜溶解性差
|
在加入缓冲液孵育之前，请使用充分研磨，或者加入缓冲液后再用组织匀浆器匀浆。
|
细胞破碎过于激烈
|
请勿使用超声进行细胞破碎。改为使用液氮研磨或者Dounce匀浆器。
|
注意事项：
1.为了您的和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。
2.本产品仅供科研使用，严禁它用。
上海跃腾生物技术有限公司
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卢经理
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