苏州北科纳米科技有限公司
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  • 所 在 地:江苏省 苏州市
  • 主营产品: mxene、核酸提取磁珠、水凝胶/气凝胶、高熵材料、核酸提取仪、纳米酶、二维材料硅铋硼、钙钛矿、核酸提取试剂盒
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主营产品: mxene、核酸提取磁珠、水凝胶/气凝胶、高熵材料、核酸提取仪、纳米酶、二维材料硅铋硼、钙钛矿、核酸提取试剂盒
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粪便核酸提取试剂盒

价格 2580.00/盒
起订量 ≥1
所在地 江苏 苏州 可售量 10000盒

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苏州北科纳米科技有限公司

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基本参数

品牌 北科纳米 型号 齐全
加工定制 产地 江苏
公差 0.01 制作工艺 熔接
形状 条形 表面处理 电镀
适用范围 电镀


货号 CAS号 编号 包装 参数 库存 补货期 价格
BK2021062313 N/A BK2021062313 100 rxns 100 2580

01/产品介绍

本试剂盒基于硅基磁珠特异性吸附DNA的原理,化学法和酶解法联合释放粪便基因组,搭配特殊研制的缓冲体系,高效除去多糖类、脂类、酸类、消化酶类及胆红素等杂质,可从0.25-5g体积的粪便样本中稳定提取基因组DNA分子,获得的基因组DNA适用于常规PCR反应、qPCR反应、酶切反应及检测等下游实验。

02/产品优势

  1. 无需酚或氯仿等有毒试剂

  2. 兼容手动及高通量操作

  3. 操作简便快捷,质量稳定

03/产品内容

04/保存条件

室温保存1年有效。

05/自备试剂

异丙醇,无水乙醇

06/注意事项

  1. 初次使用前,请向Buffer FW2Buffer FW3中加入相应体积的无水乙醇。

  2. 每次使用前摇匀各瓶中溶液,使体系均一,保证提取效果。

  3. 溶液放置一段时间后若产生沉淀(Buffer KEBuffer KEG),可37℃水浴溶解,不影响效果。

  4. 使用无菌离心管和枪头,避免外源核酸酶污染。

  5. 如果单次粪便提取量大于0.5g,可按比例扩大体系加入量和洗脱量即可。

07/使用方法

1.0.25-0.5g粪便2ml洁净离心管中。

2.向其中加入500ul Buffer KE20ulProteinase K漩涡混匀30s

3. 68℃孵育(水浴和金属浴均可)10min,每间隔2-3min漩涡混匀5s

4. 12000rpm13400g,室温离心3min转移上清液于1.5ml离心管中,加300ulBuffer KEG

200ul异丙醇及20ul磁珠悬液注意:加入前漩涡混匀磁珠悬液

5.漩涡混匀30smin,静置1min

6.重复操作步骤5两次。

7.转移离心管置于磁力架上,进行磁分离后,小心吸去液体注意:不要吸走磁珠

8.从磁力架上取下离心管,加入800ulBuffer FW1漩涡混匀30s,室温静置1min,进行磁分离,吸去除磁珠以外的液体注意:不要吸走磁珠

9.从磁力架上取下离心管,加入800ulBuffer FW2漩涡混匀30s,室温静置1min,进行磁分离,吸去除磁珠以外的液体注意:不要吸走磁珠

10.从磁力架上取下离心管,加入800ulBuffer FW3漩涡混匀30s,室温静置1min,进行磁分离,吸去除磁珠以外的液体注意:不要吸走磁珠

11.重复操作步骤10一次。

12.转移离心管于磁力架上,室温晾干8-10min注意:晾干时间不可超过10分钟,否则会影响基因组质量

13.取下离心管,加入50-150ulBuffer FTE漩涡混匀30s或用移液枪吹吸混匀20次,65℃孵育8min,期间漩涡混匀5s或吹吸混匀2次。

14.转移离心管置于磁力架上,进行磁分离,转移除磁珠以外的液体于新的离心管中,-20℃保存。

08/常见问题及应对策略

获得的基因组DNA纯度低

1.建议增加Buffer FW1Buffer FW2洗脱用量100ul

2.选用新鲜粪便样本进行提取。

3.洗涤过程中,磁珠未被充分打散,有蛋白聚集,建议增加吹吸或漩涡混匀的力度和时间或异丙醇用量由200ul减至100ul

4.提取样品量不合适,可适当放大或减少

5.BufferFTE洗脱前未充分晾干,有少量乙醇残留。

获得的基因组DNA浓度低

1.建议更换新鲜的样本进行提取。

2.减少BufferFTE的用量,或延长65℃孵育时间至15min

3.洗脱过程中,磁珠未充分磁分离就转移液体,造成磁珠损失。

4.加大磁珠5ul,以增加吸附力度,从而增大得率。

5.晾干时间超过10分钟,磁珠太过于干燥,洗脱效率下降。

6.Buffer TE洗脱过程中未充分打散磁珠团块,造成基因组释放不充分。

提取过程中出现磁珠结团现象

在磁珠法提取过程中,由于大量染色质核酸吸附在磁珠表面,绝大多数情况下会出现磁珠结团的现象。此现象可作为核酸含量的判别指标,一般来说,有结团说明样本良好,吸附过程顺利高效,只要操作者在洗涤和洗脱过程中,充分打散团块就可得到理想的基因组DNA分子。



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