上海抚生实业有限公司

主营产品： elisa试剂盒、PCR检测试剂盒、标准品、菌种、科研抗体、生化试剂

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多粘芽孢杆菌保存方法

价格	￥800.00/株
起订量	≥1
所在地	上海上海	可售量 10000株

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基本参数

品牌	抚生	型号	FSJ1477
含量	99%	级别	优级纯GR
用途范围	产品仅用于科研	产地/厂商	国产
产品规格	100g	用途	产品仅用于科研
用途类别	菌种

菌种保藏的方法 斜面保藏法和穿刺保藏法 沙土管干燥保藏法：

真空冷冻干燥保藏法液氮保藏法悬液保藏法低温保藏法一种良好的菌种保藏方法，首先应保持原菌优良性状长期稳定，同时还应该考虑方法的通用性、操作的简便性和设备的普及性。具体的方法很多，现把多种方法按类排列后作一综合性表解，以便读后有一全面了解。

产品名称	多粘芽孢杆菌保存方法
英文名称	Bacillus polymyxa
货号	FSJ1477

使用说明书：

●复苏菌种前需先准备好适用于该菌生长的固体、液体培养基和培养设备，以形成无菌的操作环境。

●多粘芽孢杆菌保存方法开启之前，先用75%酒精棉消毒试管表面，按铝盖上的箭头方向打开瓶盖和胶塞，加入0.3ml左右的配套液体培养基，用无菌滴管反复吹吸，将冻干菌种溶解为悬液，然后用无菌滴管或接种环移至斜面、平板或液体培养基，并连同剩余菌悬液的试管一起放置于36℃培养箱中进行培养。

●次日观察菌种的生长情况，如未生长，应继续培养24h，或吸取培养之后的试管剩余菌悬液再次接种培养，培养24小时观察。

●菌株为一次性使用品，暂不开启的菌种应在4℃环境下保存。

●复苏后的菌种在传1-2代以后使用，建议菌种使用5代后弃用。

★综合微生物的培养方法，包括以下步骤：

（1）前期准备：（A）灭菌处理；（B）制备Biolite水；（C）检查设备和材料；

（2）按比例配制培养材料；

（3）导入曝气，进行繁殖培养；

（4）取液观察；（a）取液；（b）稀释菌液；（c）平板培养；

（5）分离并检测；

（6）取液储存；通过该综合微生物培养方法简单可操作性强，培养的综合微生物均在3代以内，菌类稳定不发生突变，且繁殖快速。

实验内容：

1.称量→溶化→调pH→过滤→分装→加塞→包扎→灭菌→无菌检查

2.干热灭菌：装入待灭菌物品→升温→恒温→降温→开箱取物

3.高压蒸汽灭菌：加水→装物品→加盖→加热→排冷空气→加压→恒压→降压回零→排汽→取物→无菌检查

4.过滤除菌：组装灭菌→连接→压滤→无菌检查→清洗灭菌

菌种的培养：

1、菌种是指食用菌菌丝体及其生长基质组成的繁殖材料。菌种分为母种（一级种）、原种（二级种）和栽培种（三级种）三级。工业发酵的有用菌种，其筛选步骤包括菌种分离、初筛和复筛。

2、挑选具有某种能力的有用菌种，也称种子制备，是指菌种在一定条件下，经过扩大培养成为具有一定数量和质量的纯生产菌种的制备过程。以作接入发酵罐中进一步扩大菌体量及合成产物之用。

3、种子制备包括孢子制备和菌丝体制备菌种制备。

4、保存在沙土管或冷冻管中的生产菌种，用无菌手续挑取少许，接入琼脂斜面培养基上，在25℃（或较高温度）下培养5～7天（或较长时间。所得孢子还需进一步用较大表面积的固体培养基以获得更多孢子（对于霉菌类孢子制备，多数采用大米、小米之类的天然培养基）。

5、将培养成熟的斜面孢子制成悬浮液，接种到扁瓶固体培养基上，于25～28℃培养14天。将成熟的扁瓶孢子于真空中抽干，使水分降至10%以下，并放入 4℃冰箱中备用。一次制得的孢子瓶可在生产上延续使用半年左右。

6、如果有些生产菌种不产孢子，如赤霉素产生菌或产孢子不多的，则可采用摇瓶液体培养制得菌丝体，作种子罐的种子。种子罐的目的是使接入有限的孢子或菌丝体迅速发芽、生长、繁殖成大量菌体。其中的培养基组分应是易于被菌体利用的碳源（如葡萄糖）和氮源（如玉米浆），及无机盐(如磷酸盐)等。作为发酵罐的种子应生命力旺盛、染色深、菌丝粗壮，无杂菌及异常菌体。接种量一般在10%～20%。

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